بڑی سکیل پر گین کی سنتھیس کے لیے نئی اسمبلی تکنیکیں

سکرچ پر ڈی این اے فریگمنٹوں کو ملایا جانے والی اسمبلی ٹیکنالوجی ژن سنتھیسس کا بنیادی حصہ ہے، جس میں طریقے شامل ہیں جیسے بائیو برک™، ٹار، بی جی ایل برک، گولڈن گیٹ، گیبسون اسمبلی، سی پی ای سی اور اوورلاپ پی سی آر۔ موجودہ ٹیکنالوجی کی محدودیتوں کی وجہ سے یہ ضروری ہے کہ ژن لمبائی کی ڈی این اے کو ایک گام شدہ طریقے سے صحیح طور پر سنتھیس نہیں کرنے کے لئے، ان وٹرو اور ان وائیو اسمبلی ٹیکنیکوں کو جوڑا جاتا ہے تاکہ سگمنٹوں میں سنتھیس کردہ اولیگونیکلیوڈ فریگمنٹوں کو لمبے ڈی این اے فریگمنٹوں میں تبدیل کیا جاسکے۔

ان وٹرو اسمبلی ٹیکنیک

انہیں ٹکڑے کے سائز اور تسلسل کی خصوصیات پر مبنی مختلف طریقوں میں شعبہ بند کیا جاتا ہے، جس میں آلہ انزائمس کے استعمال کی مشترکہ ضرورت ہوتی ہے۔ اوورلپ PCR، DNA پولیمریز طریقہ پر مبنی ہے، جو عمل میں آسان اور تیز ہوتا ہے۔ بائیو برک اور BglBrick طریقوں میں، جو ایسوشیزمز پر مبنی ہیں، معیاری تجمیع کی اجازت دیتی ہے، لیکن بائیو برک طریقہ فیوزن پروٹینز کے لئے مناسب نہیں ہوتا۔ گولڈن گیٹ کلوننگ طریقہ، جو ٹائپ IIS رestriction انزائمس پر مبنی ہے، متعدد ٹکڑوں کی کارکردگی سے حوصلہ افزائش کرتا ہے۔ گیبسن اسمبلی طریقہ، جو متعدد آلہ انزائمس کے مجموعے کو استعمال کرتا ہے، سائز میں کچھ سو کب تک پہنچنے والے ٹکڑوں کی کارکردگی کو بہتر بناتا ہے۔ DNA کمپوننٹس کا معیاری ڈیزائن موجودہ ٹکڑوں کی استعمالی شرح کو بڑھاتا ہے۔

جیونومیکس کی داخلہ میں اسمبلی کی طریقہ العمل

حالت یہ ہے کہ لابرٹری میں اسمبلی کیے گئے ٹکڑے کچھ سو کب کے سائز تک پہنچ سکتے ہیں، لیکن تولید کبھی کبھی کافی نہیں ہوتی، جس کے لئے عوارضی جانداروں کی طرف سے امپلیفیکشن ضروری ہوتی ہے، جیسے ایشریشیا کالی 20 کیلوبیٹس سے زیادہ ٹکڑوں کو جمع کرتے وقت، اورگنزمز کے اندر ریکمبنٹ سسٹمز کا استعمال کیا جاتا ہے، جن میں Bacillus subtilis، خمیر اور مصنوعی باکٹیریا شامل ہیں۔ خمیر، ایک عام طور پر استعمال ہونے والے میزبان کے طور پر، سالوں سے بھرپور ہومولوگس ریکمبائنیشن کی صلاحیت کے لئے معروف ہے۔ اسے کئی میگابیسس (Mb) لمبائی تک کی اصطناعی کروموزومس جمع کرنے کے لئے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔ علاوہ ازیں، Saccharomyces cerevisiae کروموزوم لمبائی کے لئے انتہائی تحمل ظاہر کرتی ہے، جو اعلیٰ اورگنزمز میں خمیر کے استعمال کے لئے نظریہ بنانے کا اساس فراہم کرتی ہے۔

استعمالات

یاوہائی بائیو فارما مین پrimarily دو جمع کرنے کی طریقتوں کو استعمال کرتی ہے ژن تخلیق کے لئے: لیگیز اسsembلly اور ڈی این اے پولیمریز اسSEMBLY۔ لیگیز اسSEMBLY کی طریقت 5'-فاسفٹیلیٹڈ آلوگونیکلائٹ فریگمنٹس کو ڈی این اے لیگیز کے ذریعے ڈبل سترنڈ ڈی این اے میں جڑتی ہے۔ پولیمریز اسSEMBLY کی طریقت ڈی این اے پولیمریز کو استعمال کرتی ہے تاکہ اوورلاپنگ آلوگونیکلائٹ فریگمنٹس کو ہائبرڈائزیشن کے ذریعے بڑھایا جائے، مختلف لمبوں کی میکسچر حاصل کی جاتی ہے، اور آخر میں پرائمرز کے ذریعے کامیابی سے جمع شدہ پوری لمبائی کے فریگمنٹس کو وضاحت کیا جاتا ہے۔ یاوہائی کلائنٹس کی خاص ضروریات کو ژن تخلیق میں پورا کرنے میں مدد کرسکتی ہے۔

ہم عالمی شرکاء یا انفرادی شرکاء تلاش کر رہے ہیں۔ ہم صنعت میں سب سے زیادہ رقابتی Compensations پیش کرتے ہیں۔ اگر آپ کو کوئی سوال ہے تو ہمارے ساتھ تماس کریں: [email protected]